Espectrofotometria UV-Vis e a Lei de Beer-Lambert

A espectrofotometria UV-Vis é uma das técnicas analíticas mais versáteis e acessíveis em laboratórios químicos. Baseia-se na medição da absorção de luz ultravioleta (200–400 nm) ou visível (400–700 nm) por substâncias em solução.

A Lei de Beer-Lambert

A lei fundamental da espectrofotometria relaciona a absorbância com a concentração:

A = ε × l × c

A = ε × l × c

Onde:

• A = Absorbância (adimensional)
• ε = Absortividade molar (L·mol⁻¹·cm⁻¹) — característica do composto
• l = Caminho óptico (cm) — espessura da cubeta
• c = Concentração (mol/L)

Transmitância vs. Absorbância

Faixa linear ideal: A entre 0,1 e 1,0 (T entre 10% e 80%)

Escolha do Comprimento de Onda (λ)

Sempre analise no λ máximo (λmax) — o comprimento de onda de maior absorbância:

1. Máxima sensibilidade (maior ε)
2. Menor erro de leitura (região mais plana do espectro)
3. Menor interferência de outros compostos

Tipos de Cubetas

Regra prática: Para análises no UV (abaixo de 340 nm), use obrigatoriamente cubetas de quartzo. Cubetas de vidro ou plástico absorvem fortemente no UV e darão resultados errados.